本方法適用范圍是用于醫(yī)藥或獸醫(yī)的油狀維生素A(或維生素 AD3,),而且其含量至少應(yīng)為500,000IU/克。
1 原理
將維生素A溶于2-丙醇中,然后用紫外分光光度汁在326m下測(cè)定
2 安全措施
防備揮發(fā)氣體裝 (通風(fēng)櫥)
3 試劑
適用于分光光度汁的2-內(nèi)醇
4 儀器
常規(guī)實(shí)驗(yàn)室器皿
紫外,可見(jiàn)光分光光度汁,其波長(zhǎng)精度至少達(dá)士o.2nm
5 步驟
注意:操作必須在沒(méi)有光線直芭射或全部使用棕色玻璃器皿的條件下進(jìn)行
5.1-制備溶液
高度精確地 (土0.01毫克)稱取約含60,000IU維生素A油狀物 (相當(dāng)于含
量為2,500,000IU/克的維生素A丙酸醋25毫克,或含量為1,700,000/IU克的
維生素A棕櫚酸醋35毫克)的樣品。
將其溶解于2-丙醇中。用2-丙醇定容。旅蕩搖勻形成勻質(zhì) (必須保證
樣品徹底溶解)。
用取液器吸取2毫升溶液轉(zhuǎn)移于100毫升容量瓶中。用2-丙醇定容至刻
度。徹底搖勻后做為待測(cè)溶液 (待測(cè)溶液維生素A含量應(yīng)在10-15IU/
毫升)。
5.2-分光光度計(jì)測(cè)量
使用光徑為1厘米的石英比色杯。用制備待測(cè)溶液的2-內(nèi)醇校正光密度,
在300,326,350和370nm處測(cè)定待測(cè)溶液。
6 計(jì)算結(jié)果
變量:
-M:侍測(cè)樣品的重量,單位為克
-v:總體積,單位為毫升 (按第5.1節(jié)配制肘應(yīng)為100x50=5,000)
-A326:326nm處的光吸收
-A300:300nm的光吸收
-A350:350nm處的光吸收
-A370:370nm處的光吸收
若:
A300/A326<0.593
A350/A326<0.537
A370/A326<0.142
那么,每克樣品中所含的維生素A的含量 (IU/克)應(yīng)為:
A326 x V x1900
維生素A(IU/克) =
M x 100
等式中的1900是維生素A酯類(lèi)物與國(guó)際單位的轉(zhuǎn)換系數(shù)。
如果光吸收比值較上面提供的為大 (而且分光光度計(jì)波長(zhǎng)的精確度沒(méi)有
問(wèn)題的話),那么該樣品的維生素A含量則必須根據(jù)《歐洲藥典》(Eu-
ropen Pharmacopoeia)中的B法來(lái)測(cè)定。
標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)
維生素A油狀物的含量測(cè)定